Técnica de PCR para la identificación de Citomegalovirus

Tema: Detección de Citomegalovirus (CMV) por PCR en tiempo real en sangre de lactantes menores de 1 año.

Objetivos: Conocer la prevalencia de infección por CMV con la identificación del genoma viral del Citomegalovirus por PCR en sangre, de lactantes de 0 a 12 meses de edad hospitalizados en la unidad cuidados intensivos con sospecha de infección congénita.

Tipo de muestra: Muestra de sangre periférica.

Tipo de ácido nucleico a ser extraído: ADN viral

Extracción: Extracción de ADN con el uso del Kit comercial Promega

Gen o secuencia a amplificar: Gen de expresión temprana UL54

Tamaño en pares de bases: 78 pb

Tipo de PCR: PCR en tiempo real

    Pasos: Ronda de extracción de 35 ciclos

-       Desnaturalización: 94°C por 5 min

-       Hibridación: 49°C por 15 seg

-       Extensión: 72°C por 5min

Bibliografía:

Portillo C, Samudio G, Ortiz L, Ramos P. Detección de Citomegalovirus por PCR en tiempo real en sangre de lactantes menores, Paraguay. Pediatr. (Asunción) [Internet]. 2019;46(1):26–32. Disponible en: http://scielo.iics.una.py/pdf/ped/v46n1/1683-9803-ped-46-01-26.pdf